紫外可见分光光度计是一种用于测量物质对紫外和可见光吸收光谱的精密仪器,其校准方式对于确保测量结果的准确性和可靠性至关重要。以下是对其校准方式的详细描述:
一、波长校准
1. 使用标准物质:常用的标准物质包括苯蒸气、镨钕玻璃等。苯蒸气在紫外区有明显的吸收峰,可用于校准紫外区的波长;而镨钕玻璃则在可见区有多个尖锐的吸收峰,适用于可见区的波长校准。通过与已知波长的标准物质吸收峰进行对比,可以校准仪器的波长准确性。
2. 汞灯校准:汞灯是另一种常用的波长校准工具。汞灯在特定波长下会发射出强烈的光,如253.7nm、365nm等。通过调整仪器,使测得的汞灯光谱线与已知波长相符,从而完成波长校准。
二、光度校准
1. 吸光度校准:吸光度校准是通过测量已知吸光度的标准溶液来检查和调整仪器的吸光度准确性。常用的标准溶液包括硫酸铜、重铬酸钾等,这些溶液在不同波长下的吸光度值是已知的。通过测量这些标准溶液的吸光度,并与已知值进行对比,可以校准仪器的吸光度准确性。
2. 百分透光率校准:百分透光率校准是通过测量已知百分透光率的标准溶液(如蒸馏水)来确定仪器的百分透光率准确性。蒸馏水在紫外和可见区几乎不吸收光,其百分透光率接近100%。通过测量蒸馏水的百分透光率,并与理论值进行对比,可以校准仪器的百分透光率准确性。
三、性能校准
1. 杂散光检查:杂散光是指仪器中除正常光束外的其他散射光,它会对测量结果产生干扰。通过测量无样品时的光束强度和有样品时的光束强度,可以计算出杂散光的大小。如果杂散光超过一定限度,则需要对仪器进行调整或维修。
2. 稳定性检查:稳定性检查是为了评估仪器在长时间使用过程中的性能稳定性。通过连续测量同一样品多次,并观察测量结果的变化情况,可以评估仪器的稳定性。如果测量结果变化较大,则需要对仪器进行检查或维修。
紫外可见分光光度计的校准方式包括波长校准、光度校准和性能校准等多个方面。通过定期进行校准操作,可以确保仪器的准确性和可靠性,从而获得准确可靠的测量结果。